(1)稀釋
①以無菌操作將檢樣25g(mL)放于含有225mL滅菌生理鹽水或其他稀釋液的滅菌玻璃瓶內(nèi)或滅菌乳缽內(nèi)，經(jīng)充分振搖或研磨做成1: 10的均勻稀釋液。
②用lmL滅菌吸管吸取1: 10稀釋液lmL,注入含有9mL滅菌生理鹽永或其他稀釋液的試管內(nèi)，振搖試管混勻，做成1: 100的稀釋液。
③另取lmL滅菌吸管，按上條操作依次做10倍遞增稀釋液，每遞增稀釋一次，換用1支lmL滅菌吸管。
④根據(jù)對檢樣污染情況的估計，一般選擇三個稀釋度，每個稀釋度接種三管。
⑤乳糖發(fā)酵試驗
將待檢樣品接種于乳糖膽鹽發(fā)酵管內(nèi)，每一稀釋度接種三管，置36°C士q#°C培養(yǎng)箱內(nèi)，培養(yǎng)24h±2h，如所有乳糖膽鹽發(fā)酵管都不產(chǎn)氣，則可報告大腸菌群陰性，如有產(chǎn)氣者則繼續(xù)做以下實驗。
(2)分離培養(yǎng)將產(chǎn)氣的發(fā)酵管分別轉(zhuǎn)種在伊紅美藍瓊脂平板上，置36°c±rc培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)18～24h，然后取出，觀察菌落形態(tài)，并做革蘭染色和證實試驗。
(3)證實試驗在上述平板上，挑取可疑大腸菌群菌落1～2個進行革蘭染色，同時接種乳糖發(fā)酵管，置36°C士1°C培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24h±2h，觀察產(chǎn)氣情況。凡乳糖管產(chǎn)氣、革蘭染色為陰性的無芽孢桿菌，即可報告為大腸菌群陽性。
(4)報告根據(jù)證實為大腸菌群陽性的管數(shù)，查MPN檢索表，報告每100mL(g)大腸菌群的MPN值。
相關(guān)產(chǎn)品
